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劲马教您—如何选择适合你实验的抗体?

河南快3预测号码推荐 www.taqvt.com 发布日期:2019/12/12 11:05:18 阅读次数:191次

    1.一抗选择要点

    (1) 确定抗体的名字,注意中英文名字、它名、亚型等信息。

    (2) 确定你的实验类型,Elisa,WB,IHC,ICC,还是FACS。一般抗体的说明书都会列出该抗体经验证过适用于何种实验的类型,如果抗体说明 书没有提及的应用类型,并不意味着该抗体不适用于此种分析应用类型,而仅是说明尚未经过此种实验验证,请根据说明书列出的已验证的类型来选择适合你实验的 抗体。

    (3) 确定实验样本的种属,Human,Mouse,还是Rat。一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种物种实验,请根据说明书列出已验证的种属来选择适合你实验的抗体。

    (4) 样本蛋白的结构性质。了解样本蛋白的结构性质有助于选择合适的抗体,待测样本蛋白的结构域和样本在提取和处理过程中是否会变性,蛋白空间构象的改变,会影响抗体的免疫亲和反应。

    (5) 单多克隆抗体的选择。市面上的抗体还是以多克隆抗体为主,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对就低;而多克隆抗体特异性稍弱,但抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等避免)。

    2.二抗选择要点

    (1)种属来源。主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。

    (2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗,以与后面的SP结合反应,而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗,如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。

8.N-acetylcysteine alleviates fluoride-induced testicular apoptosis by modulating IRE1α/JNK signaling and nuclear Nrf2 activation
Reproductive Toxicology, Volume 84, March 2019, Pages 98-107
doi.org/10.1016/j.reprotox.2019.01.001
作者单位:郑州大学
使用产品:睾酮T, 促卵泡生成激素(FSH)elisa试剂盒

9. Effect of an aqueous extract of Averrhoa carambola L. on endothelial function in rats with ventricular remodeling
Biomedicine & Pharmacotherapy,Volume 121, January 2020, 109612
doi.org/10.1016/j.biopha.2019.109612
作者单位:广西医科大学
使用产品:TGF-β ELISA试剂盒

10. Applying fungicide on earthworms: Biochemical effects of Eisenia fetida exposed to fluoxastrobin in three natural soils
Environmental Pollution,Available online 23 November 2019, 113666
Doi.org/10.1016/j.envpol.2019.113666
作者单位:山东农业大学
使用产品:8-OHdG ELISA试剂盒

11. Therapeutic potential of buckwheat hull flavonoids in db/db mice, a model of type 2 diabetes
Journal of Functional Foods,Volume 52, January 2019, Pages 284-290
doi.org/10.1016/j.jff.2018.11.011
作者单位:吉林农业大学
使用产品:胰岛素、c -肽、游离脂肪酸(FFA)和极低密度脂蛋白胆固醇(vLDL-c)ELISA试剂盒

12. Tumor-associated macrophages promote cancer stem cell-like properties via transforming growth factor-beta1-induced epithelial–mesenchymal transition in hepatocellular carcinoma
Cancer Letters,Volume 352, Issue 2, 1 October 2014, Pages 160-168
doi.org/10.1016/j.canlet.2014.05.008
作者单位:第二军医大学
使用产品:TGF-β1 ELISA试剂盒

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